摘要
目的观察天麻素联合异钩藤碱对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导的PC12细胞活性氧簇(ROS)产生的影响,并探讨其可能的作用机制。方法采用DCFH-DA探针检测细胞内ROS水平,采用化学发光法测定细胞还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量,采用实时定量PCR法检测血红素加氧酶-1(HO-1)、醌氧化还原酶-1(NQO-1)、谷氨酸半胱氨酸连接酶催化亚基(GCLc)、修饰亚基(GCLm)和硫氧还蛋白1(Trx1) mRNA表达,采用CompuSyn软件计算天麻素和异钩藤碱联合应用的联合指数和最佳搭配浓度。结果 1μM和0.3μM分别为天麻素和异钩藤碱抑制MPP+诱导的PC12细胞ROS产生的最小有效浓度,24 h为天麻素和异钩藤碱抑制MPP+诱导的PC12细胞ROS产生的最佳孵育时间,1μM天麻素联合0.3μM异钩藤碱清除ROS协同效应最强。天麻素联合异钩藤碱显著增加MPP+处理的PC12细胞总GSH含量和GSH/GSSG比值,上调HO-1、NQO1、GCLc和Trx1 mRNA表达,而天麻素联合异钩藤碱的这些药理作用与调控细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)、蛋白激酶B(Akt)和糖原合成激酶-3β(GSK-3β)信号通路有关。结论天麻素联合异钩藤碱对MPP+诱导的PC12细胞ROS清除具有协同效应,其机制可能与上调HO-1、NQO1、GCLc和Trx1 mRNA表达有关。
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单位齐齐哈尔医学院