乙型肝炎患者血清及外泌体内HBV-DNA提取及检测的方法学研究

作者：徐旭; 张丽; 孔祥鑫; 刘佳敏; 杨云川; 王浩; 张自力; 潘万龙^*

来源：中国免疫学杂志, 2023, 39(08): 1736-1741.

• 血清
• 外泌体
• HBV-DNA提取
• 检测

目的：比较煮沸法与苯酚-氯仿法提取血清及外泌体内HBV-DNA,Taqman法与SYBR法qPCR检测HBV-DNA表达的优缺点，并寻找更为准确敏感的诊疗参考指标。方法：收集高病毒载量组与低病毒载量组的血清，提取血清外泌体并鉴定，分别提取血清与外泌体内HBV-DNA，比较分析煮沸法与苯酚-氯仿法提取及qPCR Taqman法与SYBR法检测之间的表达差异。结果：高病毒载量组（HBV-DNA>5E+02 U/ml）中煮沸法提取血清HBV-DNA,Taqman法检测值高于SYBR法（P<0.05）;Taqman测定血清HBV-DNA、SYBR测定外泌体HBV-DNA，煮沸法提取效率均高于苯酚-氯仿法（P<0.05）；血清HBV-DNA表达高于外泌体（P<0.05）。低病毒载量组（HBV-DNA<5E+02 U/ml）中煮沸法与苯酚-氯仿法提取、Taqman法与SYBR法qPCR检测血清及外泌体HBV-DNA差异均无统计学意义。外泌体HBV-DNA表达高于血清（P<0.05）。结论：两种提取及检测方法均具有一致的灵敏度与特异度。外泌体包裹的HBV-DNA水平可能是临床诊断和治疗慢性乙肝中不可或缺的关键因素。

• 单位
  川北医学院; 川北医学院附属医院