建立体外共培养血脑屏障模型评价纳米粒的胞吞转运和毒性Establishment of coculture model of blood-brain barrier in vitro for nanoparticle's transcytosis and toxicity evaluation

作者：陆伟; 谭玉珍; 蒋新国

来源：Acta Pharmaceutica Sinica, 2006, 41(4): 296-304.

DOI：10.3321/j.issn:0513-4870.2006.04.002

• 血脑屏障
• 体外模型
• 共培养
• 纳米粒
• 6-香豆素

目的建立大鼠脑毛细血管内皮细胞(BCECs)和星形胶质细胞共培养模型,评价纳米粒的跨血脑屏障(BBB)转运和对内皮细胞紧密连接的毒性.方法采用复乳/溶媒蒸发法制备载荧光探针6-香豆素的聚乙二醇-聚乳酸纳米粒.首先,分别从新生鼠大脑分离培养BCECs和星形胶质细胞并进行免疫组化鉴定.然后,将BCECs接种于细胞培养池微孔膜的上面,将星形胶质细胞接种于膜下面建立共培养模型.分别测定14C-蔗糖和纳米粒的渗透系数.结果载6-香豆素纳米粒的平均重均粒径为(102.4±6.8)nm,zeta电位为(-16.81±1.05)mV.BCECs的Ⅷ因子表达呈阳性;星形胶质细胞的胶质原纤维酸性蛋白表达呈阳性.模型的跨内皮细胞电阻值为(313±23)Ω·cm2.扫描电镜和透射电镜观察发现,共培养模型中的BCECs形成紧密连接.纳米粒的质量浓度低于200μg·mL-1时,不影响14C-蔗糖渗透系数的改变,表明其不会影响BBB内皮细胞的紧密连接.10 μg·mL-1载6-香豆素纳米粒的渗透系数为0.29×10-3cm·min-1.结论该大鼠BBB模型与体内情况接近,适合用于评价纳米粒的脑内转运和毒性.

• 单位
  复旦大学