茎环法通用探针定量检测成熟型微RNA方法的建立

作者：周斌; 黄理宾; 谢旭琴; 李园

来源：中华生物医学工程杂志, 2017, 23(03): 189-192.

• 微RNAs
• 聚合酶链反应
• 荧光抗体技术
• 茎环法

目的建立通用型荧光探针用于不同成熟型微RNA的定量检测。方法基于茎环法发明者发明且目前应用最为广泛的茎环框架,采用Primer Premier 5.0软件在其茎环框架内部设计了一通用的荧光探针及不同的引物对。采用以上探针和引物对对hsa-miR-143-3p,hsa-miR-145-5p,hsamiR-124-3p,hsa-miR-339-5p,hsa-miR-361-5p,hsa-miR-423-3p和hsa-miR-486-5p进行定量检测。结果结果表明该通用型荧光探针可用于不同成熟型微RNA(hsa-miR-143-3p,hsa-miR-145-5p,hsamiR-124-3p,hsa-miR-339-5p,hsa-miR-361-5p,hsa-miR-423-3p,hsa-miR-486-5p)的定量检测。结论该通用型探针可用于茎环法定量检微RNA,可让定量更加准确、实验成本更低。理论上该探针可以用于所有的成熟型微RNA进行荧光定量PCR检测。

• 单位
  四川大学华西医院