ELA/APJ通过上调miR-133a抑制心肌细胞在缺血缺氧条件下凋亡的机制研究

作者：陈旭翔; 侯婧瑛; 龙会宝; 吴浩; 伍权华; 杨欢; 符佳颖; 王彤^*

来源：中国医药导报, 2019, 16(15): 12-181.

• ELABELA
• 血管紧张素受体AT1相关的受体蛋白
• 缺血缺氧
• 心肌细胞
• 细胞凋亡

目的观察血管紧张素受体AT1相关的受体蛋白(APJ)的内源性配体ELABELA(ELA)对心肌细胞在缺血缺氧条件下凋亡的影响,并探讨miR-133a在其中的调控机制。方法将体外培养的心肌细胞分为Control组、ELA治疗组、ELA+si APJ组、ELA+siAPJ NC组、ELA+miR-133a inhibitor组、ELA+miR-133a inhibitor NC组,在缺血缺氧条件(无血清,1%体积分数O2)下培养24 h。免疫荧光鉴定心肌细胞标志物心肌α肌动蛋白(α-SA)和心肌肌钙蛋白T(cTnT)表达情况。流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况。Western blot、qRT-PCR检测各组细胞APJ、miR-133a的表达情况。结果 (1)与Control组比较,ELA治疗组细胞早期凋亡率与晚期凋亡率显著减少(P <0.01);(2)与对应的NC组细胞比较,ELA+siAPJ组、ELA+mi R-133a inhibitor组细胞早期凋亡率与晚期凋亡率明显增加(P <0.01);(3)与Control组比较,ELA治疗组细胞APJ的蛋白与m RNA表达量、miR-133a的m RNA表达量均明显升高(P <0.01);(4)采用siRNAs阻断APJ的表达后,与ELA+siAPJ NC组比较,ELA+siAPJ组细胞APJ的蛋白与mRNA表达量、miR-133a的mRNA表达量均显著减少(P <0.01)。采用siRNAs阻断miR-133a的表达后,ELA+miR-133a inhibitor组细胞APJ的蛋白与mRNA表达量与ELA+miR-133a inhibitor NC组比较,差异无统计学意义(P> 0.05),miR-133a的mRNA表达量显著减少(P <0.01)。结论 ELA能够抑制心肌细胞在缺血缺氧环境下的凋亡,此效应可能与其激活APJ之后上调miR-133a有关。

• 单位
  中山大学附属第八医院; 中山大学孙逸仙纪念医院