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摘要
目的构建SJIR-2基因的真核表达载体,检测该基因在真核细胞内的表达,为进一步研究该基因作为血吸虫免疫疫苗打下基础。方法 PCR反应扩增出目的基因SJIR-2后插入到真核表达载体pEGFP中,双酶切鉴定并进行序列测定,以脂质体介导的方法转染293T细胞,再以Western blot方法检测该基因的编码蛋白在293T细胞内的表达情况。结果 PCR反应扩增出目的基因SJIR-2,构建了p EGFP-SJIR-2真核表达载体,双酶切鉴定插入片段大小正确,DNA测序结果与GeneBank中的SJIR-2基因序列同源性为100%,重组基因成功转染进293T细胞中,Western blot检测出该蛋白在293T细胞内的表达。结论成功构建了pEGFP-SJIR-2真核表达载体,该基因编码的蛋白可以在真核细胞内表达,为我们进一步探索SJIR-2基因的重组疫苗在血吸虫病防治中的作用打下基础。
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单位上海市中西医结合医院; 上海中医药大学
