负载肺癌干细胞膜微粒的DC-CIK对耐药肺癌细胞的靶向杀伤作用及对肺癌干细胞凋亡的影响

作者：段琼; 王金燕; 苏海川; 刘征丽; 孙建中; 唐兴宇; 庞翠; 刘文超; 张菊

来源：现代肿瘤医学, 2016, 24(15): 2337-2342.

• 树突状细胞
• 细胞因子诱导的杀伤细胞
• 膜微粒
• EGFR-TKI耐药
• 肺癌干细胞

目的:探讨负载肺癌干细胞膜微粒的DC-CIK细胞对EGFR-TKI耐药肺癌细胞的杀伤作用及对肺癌干细胞凋亡的影响机制。方法:无血清悬浮细胞培养法富集EGFR-TKI耐药肺癌细胞A549、H292干细胞样细胞,RT-PCR检测干细胞标志物,裸鼠成瘤实验鉴定致瘤性。超滤和差速离心法获取肺癌干细胞膜微粒。流式细胞术分别测定共孵育组和常规培养组DC成熟标志CD86和CD83,测定两组DC-CIK细胞表型CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD56+、CD3+CD4+;形态观察及MTT法分别测定不同效靶比两组DC-CIK对A549、H292的杀伤效应;ELISA法分别检测两组DC-CIK上清中IL-2、IFN-γ、TNF-α分泌水平;流式细胞术分别测定两组DC-CIK对肺癌干细胞凋亡的影响。结果:富集培养获得的EGFR-TKI耐药肺癌干细胞样细胞高表达干细胞标志物Sox2和Oct4,并具较强裸鼠致瘤性。负载膜微粒的DC成熟标志CD86和CD83较常规DC表达显著升高;负载膜微粒的DC-CIK较常规DC-CIK细胞表型CD3+、CD3+CD8+、CD3+CD56+、CD3+CD4+升高,对EGFR-TKI耐药肺癌细胞杀伤效应高于常规DC-CIK,并具有显著提高的靶向趋向性;负载膜微粒的DC-CIK分泌因子对EGFR-TKI耐药肺癌干细胞样细胞凋亡的影响与常规DC-CIK不同。结论:与常规培养DC-CIK相比,负载膜微粒的DC-CIK活性提高,对EGFR-TKI耐药肺癌细胞的体外特异靶向杀伤效应显著提高。细胞分泌因子可显著上调耐药肺癌干细胞的细胞凋亡率。

• 单位
  第四军医大学; 西京医院; 唐都医院