非洲猪瘟病毒pB602L蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

作者：黄甜; 王彦伟; 曹红梅; 郝丽影; 邓均华^*; 田克恭^*

来源：黑龙江畜牧兽医, 2021, (11): 88-92.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2020.06.0374

• 非洲猪瘟病毒
• pB602L蛋白
• 单克隆抗体
• 间接ELISA方法
• 特异性

为了制备非洲猪瘟病毒(African swine fever virus, ASFV)pB602L蛋白单克隆抗体,试验利用大肠杆菌表达系统表达重组pB602L蛋白,并免疫Balb/c小鼠,经细胞融合及亚克隆获得稳定分泌抗ASFV pB602L蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,通过对小鼠腹腔注射细胞制备单克隆抗体,并采用间接ELISA方法测定其效价,单克隆抗体亚类鉴定试剂盒测定其亚类,Western-blot鉴定其特异性,ASFV抗原包被板鉴定其反应性。结果表明:获得17株稳定分泌抗ASFV pB602L蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,制备的腹水效价均不低于1∶1 280 000;重链亚类分别为IgG1、IgG2a和IgG2b,轻链均为κ;均能特异性识别重组pB602L蛋白;有16株单克隆抗体与ASFV抗原发生不同程度的抗原-抗体反应,反应的OD450值最高可达1.098。说明首次制备的ASFV pB602L蛋白单克隆抗体特异性好,可与病毒抗原反应。