摘要

目的探讨微小RNA-4478(miR-4478)对结肠癌细胞增殖、迁移、侵袭的作用并阐明相关机制。方法实时定量聚合酶链式反应(PCR)检测miR-4478在结肠癌组织中的表达。结肠癌SW1116细胞转染miR-4478 mimics及阴性对照后,分别采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)和小室(Transwell)法检测细胞的增殖、迁移及侵袭。预测miR-4478的靶基因,双荧光素酶报告基因实验验证靶基因。结肠癌SW1116细胞转染miR-4478 mimics或抑制物后,蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测细胞靶基因表达。靶基因过表达验证细胞增殖、迁移及侵袭。Western blot法检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、P21、钙粘附蛋白E(E-cadherin)蛋白表达。结果相对于癌旁组织,miR-4478在结肠癌组织中的表达显著降低[(0.84±0.07)比(0.26±0.02),t=48.461,P<0.05];转染miR-4478 mimics可显著抑制细胞增殖、迁移及侵袭(P<0.001)。miR-4478可负向调控MDM2表达(P<0.001)。miR-4478过表达可抑制由MDM2过表达导致的结肠癌细胞增殖、迁移及侵袭(P<0.001)。结论 miR-4478通过抑制MDM2表达而抑制结肠癌细胞增殖、迁移及侵袭。

  • 单位
    西安交通大学第一附属医院; 长安医院