内皮抑素基因腺病毒载体的构建及表达

作者：傅玉峰; 苏长青; 肖明; 丁炯

来源：江苏大学学报(医学版), 2006, (06): 500-503+558.

DOI：10.13312/j.issn.1671-7783.2006.06.011

• 内皮抑素
• 腺病毒
• 真核表达
• 胃癌

目的:构建人内皮抑素(Hum an Endostatin,hE)基因的腺病毒载体,并研究其对胃癌细胞株SGC-7901、MKN-45及人脐静脉内皮细胞系ECV304生物学特性的影响。方法:采用L ipofectam ine2000法将含有人内皮抑素基因的质粒pCA13-hE与pBGHE3共同转染293细胞;免疫荧光法及W estern B lot检测hE的表达;用不同感染复数(Mu ltip lic ity of infection,MO I)的重组人内皮抑素基因的腺病毒感染ECV304细胞,观察细胞生长。结果:成功构建了含hE基因的腺病毒载体;经含hE基因腺病毒载体感染的人SGC-7901胃癌细胞株、MKN-45胃癌细胞株均表达hE蛋白;表达的hE蛋白具有一定的生物学活性,可以抑制人静脉内皮细胞系ECV304的生长。结论:获得了有表达功能活性的Endostatin腺病毒载体,表达产物可抑制ECV304细胞的增殖,为肿瘤的抗血管基因治疗提供了必要条件。

• 单位
  南京师范大学; 南京医科大学