摘要
目的 探讨过度劳累(OW)对大鼠动脉血管壁细胞外基质的影响。方法 清洁级SD大鼠18只,采用随机数字分组法分为3组(n=6):对照组无特殊处理;OW组每日强迫游泳2次,连续15 d;睡眠限制(SD)+OW组每日强迫游泳2次后放入水上平台限制睡眠,连续15 d。第16天深度麻醉大鼠,心脏取血后分离大鼠腹主动脉与颈总动脉,取部分腹主动脉进行胶原纤维Masson染色,颈总动脉行弹性纤维EVG染色,用Image J图像软件定量分析胶原纤维和弹性纤维含量,用免疫组织化学法进行Ⅰ型胶原(Col-1)蛋白定量,透射电镜检查血管基质超微结构;其余腹主动脉采用实时荧光定量PCR分析方法测定基质金属蛋白酶(MMP)-1、 MMP-2、MMP-9、组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)及Col-1的mRNA表达。结果 胶原纤维定量分析显示,与对照组相比,OW组与SD+OW组胶原纤维含量差异均无统计学意义(P均>0.05);弹性纤维定量分析显示,与对照组相比,OW组与SD+OW组弹性纤维含量均显著下降(P均<0.001),OW组与SD+OW组比较差异无统计学意义(P>0.05);透射电镜显示,与对照组相比,OW组血管壁出现轻微纤维断裂,SD+OW组血管壁纤维出现虫蛀样或海绵状纤维碎裂;实时荧光定量PCR分析结果显示,与对照组相比,OW组和SD+OW组MMP-1与MMP-2的mRNA表达均显著增加(P均<0.001),OW组与SD+OW组比较差异无统计学意义(P>0.05);3组MMP-9、TIMP-1的mRNA表达差异均无统计学意义(P均>0.05);OW组与SD+OW组Col-1的mRNA表达均显著低于对照组(P均<0.001),Col-1的蛋白表达也显著低于对照组(P均<0.001),OW组与SD+OW组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 OW可降低动脉血管细胞外基质中Col-1与弹性纤维含量,破坏血管壁的弹性板层,增加MMP-1与MMP-2的表达,造成动脉血管损伤。
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