δ-氨基-γ-酮戊酸合成酶(ALAS)基因的克隆与原核表达

作者：赵艳琼; 刘峰; 王美玲; 李存保

来源：内蒙古师范大学学报(自然科学汉文版), 2014, 43(06): 766-770.

• δ-氨基-γ-酮戊酸合成酶
• 重组蛋白
• 基因工程
• RT-PCR
• 大肠杆菌

为获得ALAS的重组表达蛋白,以人肝脏组织cDNA为模板,通过PCR扩增得到ALAS全长片段并测序,成功构建了pET30a(+)-ALAS融合表达载体并转化大肠杆菌Rosetta(DE).IPTG诱导融合蛋白表达.SDS变性凝胶电泳结果显示,融合蛋白的分子量约70kDa,并且在上清液中有少量表达.经镍柱一步纯化得到His6-ALAS融合蛋白.

• 单位
  内蒙古医科大学; 基础医学院