摘要
目的:构建ABH1重组蛋白原核表达载体及建立ABH1蛋白纯化技术。方法:应用PCR技术从人的cDNA文库扩增出ABH1基因片段,并加入限制性内切酶位点和终止子,进而将其插入到原核表达质粒pET-15b中,构建ABH1/15b原核表达克隆,最后用IPTG诱导其在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,用镍柱亲和纯化,离子交换层析及凝胶过滤层析三步法纯化ABH1蛋白,并采用电泳迁移率实验(EMSA)检测所
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单位北京生命科学研究所; 郑州大学