结核杆菌ESAT-6抗原及Flt3配体双表达核酸疫苗的构建与体外表达

作者：徐闻欢; 徐娟; 王迎伟; 陈霞; 高玲娟; 吴宜琴

来源：南京医科大学学报(自然科学版), 2007, (01): 23-26.

DOI：10.3969/j.issn.1007-4368.2007.01.006

• 结核杆菌
• ESAT-6
• FL

目的:构建可同时表达flt3配体(flt3-ligand,FL)和结核杆菌6kD早期分泌蛋白(ESAT-6)的重组pIRES质粒,并在大鼠肾小球系膜细胞(GMC)中表达,为进一步研究结核杆菌DNA疫苗提供实验基础。方法:采用PCR方法将FL和ESAT-6基因分别定向克隆入真核双表达载体pIRES。在酶切分析及序列测定后,用脂质体转染至GMC细胞,Westernblot鉴定其体外表达。结果:核酸序列测定证实重组质粒构建正确,该重组质粒在体外GMC细胞中能表达FL和ESAT-6两种蛋白。结论:成功构建了结核杆菌FL和ESAT-6双顺反子真核表达质粒,并在体外实现了共表达。

• 单位
  南京医科大学