酸枣愈伤组织转化体系构建及在ZjBRC1调控ZjYUCCA表达中的应用

作者:李亚梅; 马福利; 张山奇; 黄锦秋; 陈梦婷; 周军永; 孙其宝; 孙俊*
来源:园艺学报, 2022, 49(04): 749-757.
DOI:10.16420/j.issn.0513-353x.2021-0292

摘要

以来源于同一株酸枣实生苗的茎段、叶片、子叶和胚轴等组织为外植体试材,筛选到适合子叶、胚轴和叶片诱导愈伤组织的培养基为MS+1.0 mg·L-1 2,4-D+0.4 mg·L-1 TDZ;利用农杆菌介导法,当浸染液浓度OD600为0.6~0.8、浸染时间为30 min时,酸枣叶片、子叶、胚轴和茎段愈伤组织遗传转化率分别为31.8%、25.6%、24.5%和23.8%。利用叶片诱导的愈伤组织转化体系,获得了调控分枝发育关键因子ZjBRC1融合表达嵌合抑制子SRDX和35S::GFP空载体对照的转基因愈伤组织。荧光定量qRT-PCR分析显示,与35S::GFP转基因愈伤组织相比,ZjBRC1-SRDX下调生长素合成基因ZjYUCCA7/10-3/10-4的表达,而上调ZjYUCCA2/4/6表达。综上,本研究中建立和优化了枣愈伤组织诱导和转化体系。