TMEM88真核表达质粒的构建及其功能研究

作者：倪升丽; 胡富勇; 李增; 孟晓明; 王学富; 徐涛

来源：安徽医科大学学报, 2017, 52(06): 839-842.

DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2017.06.013

• TMEM88
• 转染
• 增殖
• 凋亡

目的构建TMEM88的真核表达质粒,并研究其对肝癌细胞增殖和凋亡的影响。方法提取人肝星状细胞的总RNA,逆转录成cDNA作为模板,利用PCR法扩增出TMEM88的CDS序列,双酶切后连接到pEGFP-C2载体上,然后进行转化、质粒抽提、酶切鉴定,最后挑取阳性克隆送生物公司测序。将pEGFP-C2-TMEM88真核表达质粒分别转染至人肝癌细胞株SMMC-7721中,通过MTT实验和流式细胞术检测其对细胞增殖和凋亡的影响。结果测序结果显示pEGFP-C2-TMEM88真核表达质粒构建成功;MTT实验结果显示,过表达组细胞的增殖率为（0.625±0.07）,显著低于正常组的（0.880±0.09）（P<0.05）;流式细胞术结果显示,过表达组细胞的凋亡率为22.1%,显著高于正常组的9.1%。结论 TMEM88能够显著抑制人肝癌细胞株SMMC-7721的增殖,并促进其凋亡,为进一步了解TMEM88的功能、寻求肝癌治疗的新方向奠定了基础。

• 单位
  安徽医科大学; 合肥市第二人民医院