突变p53基因的反义拯救研究

作者：孙玉兰; 王亚红; 张媛媛; 许少峰; 付丽

来源：中华乳腺病杂志(电子版), 2008, 2(01): 70-80.

DOI：10.3969/j.issn.1674-0807.2008.01.010

• 乳腺肿瘤
• 个体性反义RNA
• p53基因
• 基因治疗

目的研究p53基因的个体性反义RNA联合野生型p53(wt-p53)对乳腺癌细胞的增殖抑制作用,探讨体外双重基因治疗的意义。方法将wt-p53重组质粒pC53-SN3转染人乳腺癌MDA-MB-231细胞,G418筛选稳定表达wt-p53的细胞克隆(WTp53-231细胞);体外构建针对MDA-MB-231细胞p53基因突变外显子8(exon8)的反义表达载体[pGEM3zf(+/-)p53exon8],并制备其反义RNA(ASp53exon8’RNA);以MDA-MB-231细胞为对照,阳离子脂质体介导下ASp53exon8’RNA转染WTp53-231细胞;转染48h后,用MTT法检测细胞生长活性,TUNEL法检测细胞凋亡情况,免疫细胞化学LSAB染色法检测p53蛋白的表达。结果ASp53exon8’RNA转染WTp53-231细胞与ASp53exon8’RNA转染MDA-MB-231细胞比较,前者可进一步抑制肿瘤细胞增殖和诱导凋亡。结论p53基因的个体性反义RNA联合wt-p53共转染可协同抑制乳腺癌细胞增殖,达到"反义拯救"基因治疗目的。

• 单位
  天津医科大学