外源性ROS对绵羊孤雌激活胚胎发育影响的研究

作者：张通; 张家新; 孙树茂; 章培军

来源：黑龙江畜牧兽医, 2021, (09): 1-161.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2020.09.0172

• 过氧化氢
• 绵羊
• 卵丘卵母细胞复合体
• 胚胎
• 应激耐受性

为了探讨外源性活性氧(ROS)短期孵育绵羊体外成熟后卵丘卵母细胞复合体(in vitro matured cumulus oocyte complexs, IVM-COCs)对孤雌激活(parthenogenetic activation, PA)胚胎发育能力和凋亡的影响,试验以0(对照组), 10, 100, 1 000μmol/L的过氧化氢(H2O2)处理液孵育绵羊IVM-COCs 1 h,然后进行孤雌激活并培养,通过荧光探针DCHF-DA测定ROS水平,使用末端脱氧核苷酸转移酶介导的UTP缺口末端标记(TUNEL)法和碘化丙锭(PI)技术评估孤雌激活胚胎囊胚中DNA碎片化程度。结果表明:100μmol/L H2O2处理液孵育IVM-COCs 1 h后孤雌胚胎的囊胚率为(50.50±4.30)%,显著高于对照组及其他浓度处理组(P<0.05);而1 000μmol/L H2O2处理液孵育IVM-COCs 1 h后孤雌激活胚胎的卵裂率显著降低且未能发育至囊胚阶段,并诱导永久性的胚胎发育阻滞或死亡。与对照组相比,100μmol/L H2O2处理液孵育IVM-COCs 1 h后ROS水平显著升高(P<0.05),而2-细胞阶段胚胎ROS水平差异不显著(P>0.05);孤雌激活胚胎的卵裂率、囊胚平均细胞数以及囊胚中DNA碎片化比率均差异不显著(P>0.05)。说明用适量的外源性ROS短期孵育绵羊IVM-COCs对孤雌激活胚胎的形成有积极作用。

• 单位
  动物科学学院; 山西大同大学; 内蒙古农业大学