摘要
目的建立雌酮硫酸钠(ESS)单克隆抗体的制备方法。方法以ESS为抗原免疫Balb/c小鼠,筛选小鼠免疫方法,并通过方阵滴定法确定间接酶联免疫吸附测定(ELISA)方法;再以杂交瘤抗体技术获得抗ESS单克隆抗体细胞株。结果 ESS抗原5次以初次免疫200μg,加强免疫100μg的免疫剂量多点注射小鼠背部皮下免疫为小鼠最佳免疫方法;确定10μg·L-1为抗原包被浓度,1∶2 000的一抗血清稀释倍数;细胞融合率达90.2%,ELISA法筛选阳性率为4.4%,并筛选得到两株特异性较好的细胞株2C8和8A7。结论该研究筛选建立了ESS小鼠免疫方法及灵敏度高、特异性好的间接ELISA筛选体系,可用于ESS单克隆抗体的制备及检测,且建立了ESS单克隆抗体制备方法。
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单位新疆医科大学; 新疆医科大学第一附属医院