摘要

为探究获得土壤中未培养细菌资源的方法,本研究以MS无机盐为基础养分,设置1/100×TSB、1/50×R2A和土壤浸出液(SE)三种低有机营养类型,凝固剂用琼脂(A)或结冷胶(G),得到一组培养基MS+TSG、MS+TSA、MS+R2A和MS+SE,以及在此基础上添加1.5 g/L丙酮酸钠作为抗氧化剂的第二组培养基。用上述八种培养基分离培养健康番茄根际土壤中的细菌,并对各种培养基平板上代表性菌落进行16S rRNA基因分析。结果表明,在MS无机盐和低有机营养组合的培养基平板上,在28 ℃下培养28 d后可检测到菌落数达107 CFU/g土,四种培养基平板上检测到的菌落数量由多到少顺序为MS+SE>MS+TSG>MS+R2A>MS+TSB;在相同的低有机营养条件下,用结冷胶作为凝固剂可获得更多菌落,添加丙?酸钠为抗氧化剂会显著降低菌落的多样性。鉴定的84个代表性菌落属于34个属的52个种,其中7个(占检测菌株数的8.33%)为可能新种,不同培养基上种丰富度表现为MS+TSA>MS+R2A>MS+TSG>MS+SE。本研究结果说明,采用低有机营养的MS 无机盐培养基有利于分离获得土壤中的一些未培养细菌。