本发明属于微生物环境修复技术领域,公开了一种刺激微生物分泌脂肽类生物表面活性剂的方法和应用,具体公开了葡萄糖酸钠和/或植生拉乌尔菌在制备生物表面活性剂中的应用。本发明首次提出利用植生拉乌尔菌和/或葡萄糖酸钠制备生物表面活性剂,丰富了生物表面活性剂产生菌的种类以及所用的培养物质。