沉默DOT1L基因对急性单核细胞白血病细胞THP-1增殖的影响

作者：张玉娟; 李华文; 常国强; 张洪菊; 王建; 蔺亚妮; 周家喜; 李庆华; 庞天翔

来源：中国实验血液学杂志, 2013, 21(04): 861-865.

DOI：10.7534/j.issn.1009-2137.2013.04.010

• DOT1L基因
• 急性单核细胞白血病
• THP-1细胞 DOT1L gene
• acute monocytic leukemia
• THP-1 cell

本研究旨在探讨DOT1L基因对人白血病THP-1细胞增殖的影响。针对DOT1L mRNA的第732-752靶位点设计并合成shRNA,构建pLKO-Tet-On条件性干扰载体,制备慢病毒并感染THP-1细胞,用强力霉素(Dox)诱导干扰载体表达;应用RT-PCR的方法验证干扰效率;采用改良MTT法检测干扰DOT1L基因后对THP-1细胞增殖能力的影响;用细胞集落形成实验观察干扰后细胞集落形成的能力;用流式细胞术分析细胞周期的变化。结果表明:THP-1细胞干扰后DOT1L基因的表达显著降低;DOT1L基因的表达下调抑制了细胞的增殖能力、集落形成能力并将细胞周期阻滞在G0/G1期。结论:利用shR...

• 单位
  北京协和医学院; 中国医学科学院; 实验血液学国家重点实验室