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摘要
本研究目的在于构建特异性下调人Runx1基因的shRNA表达质粒。设计并合成人Runx1基因的siRNA,通过DNA重组技术将目的序列插入到pSuper质粒,采用菌落PCR、限制性内切酶酶切技术及测序方法对其进行筛选与鉴定。转染该质粒于人肺腺癌细胞A549,通过实时荧光定量PCR技术和Western blot方法分别从基因及蛋白水平对其进行功能鉴定。实验结果表明我们所构建的pSuper-Runx1-shRNA质粒能够有效抑制A549细胞Runx1mRNA和蛋白的表达,抑制率分别为33%和50%。
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单位四川大学华西医院
