钙调蛋白激酶Ⅱ抑制剂KN62对肝星状细胞增殖、凋亡的影响及机制

作者：王路广; 戴琳玉; 闫宇; 肖永红^*

来源：实用医学杂志, 2020, 36(02): 152-157.

• 肝星状细胞
• 钙调蛋白激酶Ⅱ抑制剂KN62
• 增殖
• 凋亡
• 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12

目的研究钙调蛋白激酶Ⅱ(calmodulin kinaseⅡ,CaMKⅡ)抑制剂KN62对转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)刺激的LX2肝星形细胞(LX2 hepatic stellate cells,LX2-HSCs)增殖、凋亡的影响及可能的机制。方法取1、5、10、20μmol/L KN62作用于LX2,各培养1、3、6、12、24 h,CCK-8法检测细胞增殖并依据其结果分为5个实验组:空白对照组,5 ng/mL TGF-β1组,低、中、高浓度KN62(1、5、10μmol/L)+TGF-β1组。TUNEL法检测细胞凋亡,Western Blot检测CaMK II、Bcl-2、Bax及caspase-12蛋白表达。结果 KN62作用6 h后不同时间点,各浓度组OD值比较差异均有统计学意义(P <0.05),但20μmol/L与10μmol/L比较差异均无统计学意义(P> 0.05);低、中、高浓度KN62+TGF-β1组细胞增殖率分别为82.3%、67.4%、50.1%,凋亡率分别为(30.8±6.1)%、(54.5±4.5)%、(75.7±5.6)%,差异均有统计学意义(F=80.070,P <0.001;F=73.199,P <0.001);各浓度KN62组均能降低CaMKII(F=84.355,P <0.001)及Bcl-2蛋白表达(F=110.896,P <0.001),增加Bax蛋白表达(F=156.086,P <0.001),致Bcl-2/Bax比值降低;随KN62浓度增加,procaspase-12和cleaved caspase-12蛋白表达均升高(P <0.001)。结论 CaMKⅡ抑制剂KN62能够抑制LX2增殖并诱导其凋亡,可能与caspase-12依赖性内质网应激凋亡途径有关。

• 单位
  公共卫生学院; 天津医科大学第二医院; 华北理工大学