膀胱癌组织及血浆中微小RNA的差异表达情况分析

作者：张永海; 陈凌武; 徐庆春; 林伟强; 黄月英; 黄洪; 张源锋; 刘国元

来源：中华泌尿外科杂志, 2014, 35(03): 222-225.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1000-6702.2014.03.017

• 膀胱癌
• 微小RNA
• 芯片
• 实时定量PCR
• 血浆

目的寻找并鉴定在膀胱癌和正常膀胱组织,及患者血浆中差异表达的微小RNA(miRNA)。方法 2010年10月至2011年1月收集24例膀胱尿路上皮癌(T14期)患者的新鲜肿瘤组织及血浆,其中非肌层浸润性和肌层浸润性膀胱尿路上皮癌组织各12例;12例良性前列腺增生患者的正常膀胱组织及血浆作为对照组。用Trizol试剂提取总RNA,用Nanodrop 2000及变性琼脂糖凝胶电泳进行RNA检测,用标记酶Hy3TM荧光基团标记RNA的探针和miRCURYTM芯片杂交,用GenePix 4000B芯片扫描仪及GenePix pro V6.0进行图像采集和数据分析,对差异表达的miRNA进行检测,用实时定量逆转录聚合酶链反应(real-time quantitativePCR,qPCR)对部分差异表达的miRNA进行验证。结果与正常膀胱组织比较,在非肌层浸润性膀胱癌组织中,有77个miRNA表达上调,72个miRNA表达下调;在肌层浸润性膀胱癌组织中,42个miRNA表达上调,104个miRNA表达下调。qPCR测定miR-720和miR-191的表达水平与基因芯片结果一致。与对照组比较,膀胱癌血浆样本中有19个miRNA表达上调,9个miRNA表达下调。qPCR测定miR-10b、miR-622、miR-634和miR-483-3p的表达水平变化趋势与基因芯片结果一致。结论在非肌层浸润性和肌层浸润性膀胱尿路上皮癌组织及血浆中miRNA的差异表达普遍存在,可作为膀胱癌的潜在临床诊断标志物。

• 单位
  汕头市中心医院; 中山大学