玻璃体内注射腺相关病毒介导原纤维蛋白-2基因干扰对小鼠视网膜的影响

作者：张瑞雪; 蒋文君; 石永伟; 丁捷; 许静; 温莹^*; 毕宏生^*

来源：眼科新进展, 2021, 41(09): 806-811.

DOI：10.13389/j.cnki.rao.2021.0169

• 腺相关病毒
• 原纤维蛋白-2
• 玻璃体内注射
• 视网膜病变

目的探讨玻璃体内注射腺相关病毒(AAV)介导原纤维蛋白-2(FBN2)基因干扰进行基因敲低对小鼠视网膜的影响。方法 54只8周龄C57BL/6J小鼠随机分为3组:正常对照组、阴性对照组、AAV组。正常对照组小鼠正常饲养,阴性对照组和AAV组小鼠右眼玻璃体内分别注射3μL阴性病毒或AAV。于注射后2周、3周、4周利用共焦扫描激光检眼镜(SLO)、视网膜电图(ERG)和光学相干断层扫描(OCT)分别检测各组小鼠眼底变化、视功能变化,并测量视网膜外核层(ONL)厚度,同时使用实时荧光定量PCR(RT-PCR)、ELISA检测各组小鼠视网膜中FBN2 mRNA和蛋白表达水平。结果 SLO检测结果显示,AAV组小鼠玻璃体内注射后2周视网膜开始出现黄白色沉积物,并保持至实验结束。OCT检测结果显示,AAV组小鼠出现视网膜色素上皮层光带不规则、点状高密度反射区;注射后2周、3周、4周,AAV组小鼠视网膜ONL厚度均明显小于阴性对照组和正常对照组(均为P<0.05)。ERG检测结果显示,注射后2周、3周、4周与阴性对照组和正常对照组比较,AAV组小鼠视网膜Rod-b、Max-a波振幅均明显变小(均为P<0.05)。RT-PCR、ELISA检测结果显示,注射后2周、3周、4周与阴性对照组和正常对照组比较,AAV组小鼠视网膜中FBN2 mRNA和蛋白表达均明显降低(均为P<0.05)。结论玻璃体内注射AAV介导FBN2基因干扰进行基因敲低可以引发小鼠视网膜病变。

• 单位
  山东中医药大学