干扰miR-29a抑制氧糖剥夺/复氧诱导的大鼠H9c2心肌细胞线粒体融合与分裂

作者：熊霞霞; 熊卫平^*; 李林沅; 杜娟; 王道庄; 王旭

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2022, 38(11): 998-1004.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.009478

• miR-29a
• H9c2心肌细胞
• 线粒体融合
• 线粒体分裂

目的 探讨干扰miR-29a对氧糖剥夺/复氧(OGD/R)诱导的心肌细胞线粒体融合与分裂的影响。方法 将H9c2细胞分为正常对照组、模型组、阴性对照组和miR-29a干扰组。采用OGD/R法诱导大鼠H9c2心肌细胞损伤模型，阴性对照组细胞转染anti-NC, miR-29a干扰组转染anti-miR-29a,正常对照组细胞不转染。反转录PCR检测miR-29a干扰效率，CCK-8法检测细胞增殖倍数，流式细胞术检测细胞凋亡率和线粒体膜电位变化，试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和乳酸脱氢酶(LDH)含量，Western blot法检测Bcl2相关X蛋白(BAX)、Bcl2拮抗剂/杀伤因子(BAK)、胱天蛋白酶9(caspase-9)、线粒体分裂蛋白1(Fis1)、线粒体融合蛋白1(Mfn1)、线粒体融合蛋白2(Mfn2)、视神经萎缩蛋白1(OPA1)、磷酸化的胞外信号调节激酶(p-ERK)和磷酸化的线粒体动力蛋白相关蛋白(p-Drp1)水平。结果 与OGD/R组比较，anti-miR-29a处理的OGD/R组H9c2细胞miR-29a表达水平显著降低，细胞增殖倍数显著增高，细胞凋亡率显著降低，SOD含量增高，MDA和LDH含量降低，线粒体膜电位显著增高，BAX、BAK、caspase-9、Fis1、Mfn1、Mfn2、OPA1、p-ERK和p-Drp1蛋白水平均显著降低。结论 干扰miR-29a表达可促进OGD/R诱导的H9c2细胞增殖，抑制细胞凋亡，降低线粒体氧化应激水平及增强线粒体膜电位，抑制心肌细胞线粒体过度融合与分裂。

• 单位
  四川省妇幼保健院; 四川省人民医院; 阜外心血管病医院