摘要
目的 探讨加味宫外孕Ⅱ号方含药血清诱导人绒毛膜滋养层细胞(HTR-8/SVneo)凋亡的机制。方法 36只大鼠随机分为阴性对照组,中药低、中、高剂量组,西药(甲氨蝶呤)组,中西药结合组,每组6只,各组给予相应的药物处理,于第8天给药1 h后心脏采血,制备空白血清及含药血清。各组血清与HTR-8/SVneo细胞共培养24 h,同时设置仅添加培养基处理的HTR-8/SVneo细胞作为空白对照组,流式细胞术检测细胞早、晚期凋亡率及胞浆内游离Ca2+水平,Western blot和RT-qPCR法检测细胞钙蛋白酶1(calpain-1)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-12(caspase-12)蛋白及mRNA相对表达量。结果 与阴性对照组比较,各给药组细胞凋亡率、胞浆内Ca2+水平、calpain-1、caspase-12蛋白及mRNA表达均升高(P<0.05),且中药各剂量组作用呈剂量依赖性(P<0.05),其中中药高剂量组作用优于西药组和中西药结合组(P<0.05)。结论 加味宫外孕Ⅱ号方能够诱导人绒毛膜滋养层细胞凋亡,并呈剂量依赖性,其机制可能与激活内质网应激caspase-12信号通路,增加细胞胞浆内游离Ca2+水平,上调calpain-1和caspase-12表达有关。
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