重组大鼠ΔNΔC/VEGF-C/Cys152Ser逆转录病毒载体的构建及表达

作者：杨国红; 姬文婕; 周欣; 毕莹; 李玉明

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2012, (07): 677-679.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.006482

• ΔNΔC/VEGF-C/Cys152Ser
• 逆转录病毒载体PT67
• pLPCX
• RAW264.7 ΔNΔC/VEGF-C/Cys152Ser
• retroviral vector
• PT67
• pLPCX
• RAW 264.7

目的:构建重组大鼠ΔNΔC/VEGF-C/Cys152Ser(ddVEGF-C)逆转录病毒载体,建立稳定表达ddVEGF-C的PT67包装细胞株,并验证其表达。方法:利用PCR从pSecTag-ddVEGF-C中获取大鼠ddVEGF-C基因,克隆到pLPCX逆转录病毒载体,经PCR、双酶切和测序验证,转染PT67包装细胞,嘌呤霉素筛选出稳定表达目的基因的包装细胞株,用反转录PCR(RT-PCR)和Western blot方法验证其在RAW 264.7细胞中的表达。结果:构建的pLPCX-ddVEGF-C逆转录病毒载体经双酶切和PCR鉴定正确,测序结果与ddVEGF-C序列一致,病毒滴度为2×1...

• 单位
  天津医科大学; 中国人民武装警察部队后勤学院