巨噬细胞中钙调蛋白2的缺失可缓解小鼠炎症性关节炎

作者：王硕; 白阳^*

来源：免疫学杂志, 2022, 38(02): 100-107.

DOI：10.13431/j.cnki.immunol.j.20220015

• 巨噬细胞
• 钙调蛋白2
• 炎症性关节炎

目的研究探讨抑制巨噬细胞中钙调蛋白2的表达治疗炎症性关节炎的作用和相关机制。方法取野生型小鼠(wild type,WT)和钙调蛋白2敲除(knock out, KO)小鼠构建胶原诱导炎症性关节炎模型(collagen induced arthritis,CIA),检测炎症相关因子TNF-α、IL-1β、IL-6和TGF-β的mRNA及蛋白表达变化、小鼠足趾肿胀容积变化以及炎症组织细胞大小和增殖变化。进一步在293T细胞中检测钙调蛋白2和CCL3(macrophage inflammatory protein 1-α, MIP-1α)的结合情况。在骨髓单核巨噬细胞(bone marrow macrophages,BMMs)细胞中转染钙调蛋白2过表达和抑制慢病毒,检测钙调蛋白2潜在下游CCL3的表达。最后,使用抑制钙调蛋白2的慢病毒进行炎症性关节炎小鼠的治疗作用探索,进行上述病理性检测。结果荧光定量PCR和免疫印迹实验显示,钙调蛋白2 KO小鼠关节炎组织炎症因子分泌明显降低;足趾肿胀容积明显减小;炎症组织细胞明显变大,细胞增殖明显增多。荧光素酶实验和染色质免疫共沉淀实验结果显示,钙调蛋白2与野生型CCL3的启动子区域存在结合;进一步,免疫印迹实验显示,关节炎小鼠骨髓巨噬细胞中钙调蛋白2与CCL3间存在负向调控作用。结论给小鼠关节炎组织注射Sh-calmodulin 2慢病毒的治疗作用说明抑制钙调蛋白2的表达可治疗炎症性关节炎。

• 单位
  常州市第二人民医院