pCDNA3.1-Nurr1真核表达载体的构建及其表达

作者：刘波; 黄涛; 沈勇; 蒋宏国; 杨智勇; 邓兴力

来源：广东医学, 2014, 35(22): 3471-3473.

DOI：10.13820/j.cnki.gdyx.2014.22.009

• 核相关受体因子1
• 真核表达
• 转染

目的构建核相关受体因子1(Nurr1)基因真核表达载体,观察其在HeLa细胞内的表达。方法利用RT-PCR技术从大鼠脑组织总RNA中扩增Nurr1cDNA,并将其克隆到真核表达载体pCDNA3.1中,经酶切鉴定和序列分析后,以Lipofectamine 2000介导转染HeLa细胞,应用荧光定量PCR检测鉴定Nurr1在细胞内的表达。结果 RT-PCR的产物经重组质粒pCDNA3.1酶切,DNA测序证实1 797 bp片段的碱基序列与预期目的基因基本一致。将其转染HeLa细胞后,荧光定量PCR结果表明Nurr1在真核细胞中正确表达。结论成功构建了重组真核表达质粒pCDNA3.1-Nurr1,为后续的研究奠定基础。

• 单位
  昆明医科大学第一附属医院