摘要
目的:观察苦参碱对血小板源性生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)诱导心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs)胶原分泌及表型转化的影响,同时探讨PI3K/Akt通路在其中发挥的作用。方法:通过胰酶消化法和差速贴壁法分离、纯化及培养大鼠CFs,将CFs随机分为5组:空白对照组(培养时不加药物);PDGF组(10μg/L PDGF);苦参碱小剂量组(10μg/L PDGF+0.25mmol/L苦参碱);苦参碱中剂量组(10μg/LPDGF+0.5mmol/L苦参碱);苦参碱大剂量组(10μg/L PDGF+1.0mmol/L苦参碱)。ELISA法检测细胞上清液中胶原蛋白含量,RT-PCR法测定平滑肌激动蛋白-α(α-SMA)、PI3K和Akt mRNA的表达;Western Blot法测p-Akt及α-SMA蛋白的表达。结果:干预48h后,与空白对照组比较,PDGF组上清液胶原含量明显增加(P<0.05);α-SMA、PI3K、Akt mRNA及α-SMA、p-Akt蛋白表达上调(P<0.05);与PDGF组比较,苦参碱小、中和大剂量组CFs上清液胶原含量均明显减少(P<0.05),α-SMA、PI3K、Akt mRNA及α-SMA、p-Akt蛋白表达均下调(P<0.05)。结论:苦参碱可能通过下调PI3K/Akt通路减少胶原分泌、抑制表型转化,从而发挥抗心肌纤维化作用。
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