乙型肝炎病毒X抗原结合蛋白1的原核表达及亚细胞定位

作者：樊万虎; 成军; 刘小静; 张树林; 王琦

来源：中华实验和临床感染病杂志(电子版), 2012, (05): 375-380.

• 肝炎病毒X抗原
• 乙型
• 结合蛋白
• 原核细胞 Hepatitis B X antigen
• Binding protein
• Prokaryotic cells

目的应用酵母双杂交及生物信息学技术筛选乙型肝炎病毒X抗原结合蛋白1(HBXBP1)并进行克隆,探讨其在大肠埃希菌BL21中表达及亚细胞定位。方法应用反转录PCR(RT-PCR)技术,以HepG2细胞mRNA为模板,扩增获得HBXBP1基因片段,连接到pGEM-T载体,双酶切鉴定及测序正确后克隆至原核表达载体pET-32a(+)中,转化大肠埃希菌BL21,通过IPTG诱导表达以获得HBXBP1融合蛋白,并经SDS-PAGE及Western blot分析证实融合蛋白的特异性;构建HBXBP1基因的绿色荧光蛋白表达质粒pEGFP-C1-HBXBP1,转染HepG2细胞,24h后于荧光显微镜下观察表达...

• 单位
  西安交通大学第一附属医院; 首都医科大学附属北京地坛医院