猪萨佩罗病毒YC2011株1D基因的克隆及原核表达

作者：陈俊伟; 张祥斌; 张云静; 周庆丰; 宋延华; 李薇; 陈峰; 薛春宜; 毕英佐; 曹永长

来源：动物医学进展, 2014, 35(01): 68-72.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2014.01.008

• 猪萨佩罗病毒
• 1D基因
• 原核表达

为研发猪萨佩罗病毒(PSV)检测试剂,根据PSV YC2011毒株核苷酸序列,设计针对1D基因的特异引物,以YC2011毒株为模板,利用RT-PCR方法,成功扩增出1D基因,将该基因与原核表达载体pET-32a(+)连接,转化表达菌株BL21。经PCR和测序鉴定,阳性菌株IPTG诱导表达,融合蛋白1D进行SDS-PAGE和Western blot检测分析。结果表明,成功构建了原核表达菌株,其所表达的融合蛋白分子质量约为51ku,且可被猪萨佩罗病毒阳性血清所识别。

• 单位
  中山大学生命科学学院; 华南农业大学; 广东温氏食品集团股份有限公司