miR-7和miR-30-5p抑制CTSK表达对贵州黑山羊繁殖基因的影响

作者：杨永鲜; 陆情梅; 冉铭; 刘彬; 周明帅; 温晓艳; 赵佳福^*

来源：中国畜牧杂志, 2023, 1-14.

DOI：10.19556/j.0258-7033.20221126-01

• 贵州黑山羊
• miRNA
• 卵巢颗粒细胞
• 繁殖基因

为验证miR-7和miR-30-5p对贵州黑山羊CTSK基因的调控效率及其对产羔基因的影响，通过生物软件筛选出调控CTSK效率最高的2条miRNAs：miR-7和miR-30-5p；将2条miRNAs转染至卵巢颗粒细胞，并于转染后24h和48h分别提取细胞总RNA，采用qRT-PCR法分别检测2条miRNAs在转染24h和48h的表达效率；同时检测miR-7和miR-30-5p过表达对CTSK基因及产羔相关基因FSHβ、GDF9、BMP15和BMPR-1B表达水平的影响。实验结果表明：转染miR-7和miR-30-5p至卵巢颗粒细胞24h后，2条miRNAs的表达水平均极显著高于对照组（NC组）；转染48h后，miR-30-5p表达水平极显著低于NC组，而miR-7与NC组相比无显著性差异。此外，过表达2条miRNAs对CTSK基因和繁殖相关基因的影响发现，与NC组相比，转染miR-724h后能极显著抑制CTSK的表达，且上调产羔基因FSHβ、GDF9、BMP15的表达；而转染miR-30-5p对CTSK的表达无明显抑制作用，但极显著上调了产羔基因FSHβ、GDF9、BMP15和BMPR-1B的表达。综上可见，与miR-30-5p相比，miR-7更有可能通过抑制CTSK表达来促进产羔相关基因的表达，进而影响贵州黑山羊繁殖性能。本研究结果为后续研究miR-7和miR-30-5p影响贵州黑山羊繁殖性状的分子机制奠定了基础。

• 单位
  贵州大学; 动物科学学院