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摘要
绿豆（Vigna radiata L.）是一种严格闭花授粉作物，其人工授粉效率低、成本高，通过杂交获取新品种较为困难。目前，国内外绿豆遗传转化体系鲜见报道，这极大地限制了绿豆基因功能的研究和新品种的开发，因此尝试建立绿豆遗传转化途径具有重要意义。首先对绿豆谷胱甘肽还原酶基因（GR）进行生物信息学分析，并以此为基础，构建基因编辑重组体，同时进行发根农杆菌的遗传转化。结果表明，GR蛋白相对分子质量为58.38 kDa，稳定性较好，为亲水蛋白，有多个磷酸化位点，不含跨膜结构，定位于细胞质中，二级结构主要包括ɑ-螺旋和延伸链，且含有Pyr＿redox＿2和Pyr＿redox＿dim两个结构域；系统进化分析发现该蛋白与赤豆（Vigna angularis）亲缘关系最近。在此基础上构建四靶点CRISPR/Cas9-GR-gRNA基因编辑载体，通过发根农杆菌遗传转化绿豆子叶节获取毛状根20株，后经PCR检测获取阳性克隆毛状根12株，其毛状根转化率约为60%，其研究结果可为绿豆后续基因编辑研究奠定重要基础。
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