泛素连接酶pirh2短发夹状RNA对肺癌细胞生长抑制的实验研究

作者：苏远; 白明; 朱莉萍; 金阳; 张晓菊; 周琼

来源：中华医学杂志, 2007, 87(17): 1199-1203.

DOI：10.3760/j:issn:0376-2491.2007.17.013

• RNA
• 蛋白质 p53
• 肺肿瘤
• 泛素-蛋白酶体途径

目的研究 pirh2对肺癌生长的影响。方法采用免疫组织化学法检测 pirh2在肺癌组织中的表达;构建靶向 pirh2基因的短发夹状 RNA(shRNA)干扰质粒(psiRNA-Pirh2A 和 psiRNA-Pirh2B),并设计阴性对照(psiRNA-Con)组和空质粒(psiRNA-hH1)组,转染 A549细胞;实时定量 PCR和免疫印迹法分别检测 pirh2的 mRNA 和蛋白的表达。CCK-8法检测 A549细胞的增殖;参考 CCK-8结果,选取抑制作用较强的一个 pirh2干扰质粒进行裸鼠成瘤实验。结果 53例肺癌组织中有42例pirh2阳性(79.2%);psiRNA-pirh2A及 psiRNA-pirh2B 组细胞生长均慢于正常组(q 值分别为6.82、5.63,均 P<0.05),而 psiRNA-Con 和 psiRNA-hH1组细胞增殖能力差异无统计学意义。正常对照、阴性对照和干扰组裸鼠肿瘤组织重量分别为1.66 g±0.21 g、1.48 g±0.34 g和0.59 g±0.16 g,正常组与阴性对照组之间差异无统计学意义,而干扰组肿瘤重量明显低于正常组,差异有统计学意义(t=6.27,P<0.05)。结论 pirh2过度表达可能是肺癌发生过程中一个重要的环节,成功构建的 shRNA表达载体可特异性抑制其在 A549细胞中的表达,并在体内外抑制肺癌细胞的生长。

• 单位
  华中科技大学同济医学院; 华中科技大学同济医学院附属协和医院