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摘要
目的:制备特异性白念珠菌外排泵(CaCDR1和CaCDR2)的多克隆抗体,为研究CaCDR1和CaCDR2在介导白念珠菌耐药中的作用奠定基础。方法:利用Pfam网络预测程序和Blastn、Blastx程序设计引物,采用PCR法获得白念珠菌SC5314基因组上486 bp长度的CDR1和CDR2目的基因,并将其克隆入pET-28a( )质粒,构建重组表达质粒后,转化入大肠埃希菌BL21宿主菌内,在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导下表达6×His融合蛋白;经镍柱纯化蛋白后,免疫新西兰兔,制备兔抗多克隆抗体。用ELISA及蛋白印迹法检测该抗体的效价和特异性。结果:ELISA法检测所制备抗...
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