PSP下调miR-345-5p对雨蛙素诱导的AP腺泡细胞氧化应激和炎症因子表达

作者：倪昊^*; 王发武; 李翔天; 马战胜

来源：中华细胞与干细胞杂志(电子版), 2022, 12(01): 8-13.

• 黄精多糖
• 雨蛙素
• 急性胰腺炎
• miR-345-5p
• 氧化应激
• 炎症反应

目的 探讨黄精多糖 (PSP)对雨蛙素诱导的急性胰腺炎 (AP)腺泡细胞氧化应激和炎症因子表达的影响及分子机制。方法 取对数期大鼠胰腺腺泡细胞AR42J，采用100 nmol/ L雨蛙素处理细胞6 h，建立AP腺泡细胞损伤模型，并采用不同浓度(1、2、4 mg/mL)PSP处理AP细胞(AP+PSP-L、AP+PSP-M、AP+PSP-H)。试剂盒检测细胞中丙二醛 (MDA)含量、超氧化物歧化酶 (SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶 (GPx)活性以及培养液中白细胞介素-6 (IL-6)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)和IL-1β水平，实时荧光定量PCR (RT-qPCR)检测miR-345-5p表达水平。将miR-345-5p抑制物转染AR42J细胞，检测下调miR-345-5p表达对AP细胞氧化应激和炎症因子表达的影响。将miR-345-5p模拟物转染AR42J细胞，检测上调miR-345-5p表达和PSP处理对AP细胞氧化应激和炎症因子表达的影响。两组比较采用t检验，多组间比较采用方差分析，进一步两两比较采用LSD-t检验。结果 与对照比较，AP细胞MDA含量、IL-6、TNF-α、IL-1β水平和miR-345-5p表达水平均升高，SOD和GPx活性降低 (P < 0.05)。与AP细胞比较，不同浓度 (1、2、4 mg/mL)PSP 作用的AP细胞中MDA含量[(1.08±0.07)比 (0.88±0.06)，(0.73±0.06)，(0.60±0.05) nmol/ mg]降低，SOD[(43.01±4.37)比(59.60±5.62)，(72.37±6.32)，(94.21±8.70) U/ mg]和GPx活性[(29.03±2.51)比 (44.11±4.71)，(58.07±4.20)，(72.67±6.56) U/ mg]均升高，培养液中IL-6[(310.72±22.27)比(257.01±20.85)，(192.28±17.70)，(146.93±11.90) pg/mL]、TNF-α[(223.82±21.87)比(175.57±15.85)，(137.00±11.31)，(89.26±7.05) pg/mL]、IL-1β表达水平[(41.66±3.85) 比(33.82±3.20)，(26.15±2.56)，(20.14±1.71) pg/mL]和miR-345-5p表达水平(2.78±0.24比2.38±0.21，1.91±0.12，1.25±0.13)均降低，且呈浓度依赖性，差异有统计学意义 (P 均 < 0.05)。下调miR-345-5p表达后，AP细胞中MDA含量[(1.13±0.08)比(0.72±0.06) nmol/ mg]降低，SOD活性[(41.31±3.98)比(81.73±7.62) U/ mg]和GPx[(28.82±2.97)比(61.41±5.81) U/ mg]升高，培养液中IL-6[(314.65±25.02)比159.76±11.93) pg/mL]、TNF-α[(235.18±23.13)比(100.41±8.09) pg/mL]和IL-1β水平[(48.67±4.50)比(27.73±2.54) pg/mL]降低 (P 均 < 0.05)。上调miR-345-5p表达可逆转PSP对AP细胞的影响。其中MDA含量[(0.58±0.03)比 (0.95±0.08) nmol/ mg]升高、SOD活性[(96.52±9.54)比(54.24±4.15) U/ mg]、GPx活性[(79.62±6.23)比(39.81±3.84) U/ mg]降低、IL-6[(145.38±12.49)比(275.38±21.55) pg/ mL]、TNF-α[(84.83±7.81)比(183.73±16.39) pg/mL]和IL-1β[(19.38±1.85)比(36.97±3.62) pg/mL]的表达水平升高 (P 均 < 0.05)。结论 PSP以剂量依赖方式减轻雨蛙素诱导AP细胞炎症反应和氧化应激损伤，其机制与下调miR-345-5p表达有关。

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  鼓楼医院