鸡毒支原体VLHA3.03蛋白的原核表达及免疫原性分析

作者：陈玥彤; 祁晶晶^*; 胡增金; 赵宇馨; 李浩然; 刘晓涵; 王少辉; 田明星; 郭伶; 于圣青^*; 周铁忠^*

来源：中国动物传染病学报, 2022, 30(02): 134-141.

DOI：10.19958/j.cnki.cn31-2031/s.20220221.001

• 鸡毒支原体
• VLHA
• 原核表达
• 免疫原性
• 免疫反应性

为研究鸡毒支原体(MG)的可变脂蛋白血凝素(VLHA)的生物学功能，对VLHA 3.03蛋白进行原核表达，然后进行了免疫原性和免疫反应性分析。通过Overlap PCR方法对MG Rlow株的vlha3.03基因进行点突变扩增，将突变成功的vlha3.03基因全长与原核表达载体pCold Ⅰ连接，连接产物转入大肠杆菌BL21进行诱导表达和纯化。用纯化后的重组蛋白rVLHA3.03免疫新西兰大白兔，制备兔多克隆抗体，并用ELISA检测抗体效价，再用制备的兔多克隆抗体、MG不同分离株阳性鸡血清及MS标准阳性血清分别与rVLHA3.03蛋白进行Western blot反应，分析rVLHA3.03蛋白的免疫原性和免疫反应性。结果表明，在大肠杆菌BL21中成功表达rVLHA3.03蛋白，且该蛋白具有较好的免疫原性和免疫反应性。

• 单位
  中国农业科学院上海兽医研究所; 锦州医科大学; 动物科技学院; 安徽农业大学