科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
研究从人参炮制品生晒参、红参、黑参中筛选出具有抗炎作用的蛋白酶解肽并进行对比分析。采用低温浸提法从三种炮制品中提取人参不同炮制品蛋白，采用分步酶解法，利用碱性蛋白酶、中性蛋白酶和胃蛋白酶对三种人参蛋白进行酶解，得到BGP（黑参蛋白酶解肽）、RGP（红参蛋白酶解肽）、SGP（生晒参蛋白酶解肽）三种酶解产物；使用超滤膜进行分离，分别得到不同分子量的超滤组分。通过建立脂多糖（LPS）诱导的RAW264.7炎症模型确定了具有最强抗炎活性的组分。酶联免疫法测定活性组分对RAW264.7细胞分泌一氧化氮（NO）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（(IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）的影响。分析三种蛋白酶解肽的氨基酸组成及含量。采用多元统计分析筛选出人参三种炮制品的差异性氨基酸并探究其与抑制RAW264.7细胞分泌细胞因子之间的关系。结果表明，人参三种炮制品蛋白酶解肽小于1kDa组分较其他组分相比，对RAW264.7细胞增殖的作用最强且在质量浓度为50-200 μg/mL时可显著抑制NO、TNF-α、IL-6、IL-1β的分泌（P<0.05）。质量浓度为200 μg/mL时，三种蛋白酶解肽给药组对细胞因子释放的抑制作用最强，且BGP-4对细胞因子释放的抑制作用高于RGP-4和SGP-4，具有显著差异（P<0.05）。三种蛋白酶解肽均含有17种氨基酸，但含量存在明显差异。其中，苯丙氨酸含量最高且为三种人参炮制品差异氨基酸与抑制炎症因子的分泌密切相关。本研究初步探讨了炮制对人参抗炎活性的影响，并筛选出不同炮制品的差异性氨基酸，为人参炮制品的加工提供了参考依据。
- 单位
