摘要
基于Tris辅助法制备颗粒大小均匀、颜色鲜艳、稳定性好的胶体金,并以此建立一种快速、便捷、稳定的猪轮状病毒现场检测技术。试验采用Tris辅助法制备胶体金,将其与轮状病毒标记抗体Ab2偶联,喷涂在结合垫上,以轮状病毒捕获Ab1抗体和羊抗鼠IgG包被硝酸纤维素膜,分别作为检测线和质控线。同时优化胶体金最适pH、抗体最佳使用量,并通过灵敏度试验、特异性试验、重复性试验、稳定性试验以及临床试验,考察试纸条的性能。结果表明,基于Tris辅助法制备的胶体金猪轮状病毒免疫层析试纸条,可检出稀释400倍临床样品中的轮状病毒,与相似病毒无交叉干扰,批间、批内试纸条检测同一样品时,无明显差异,在4℃、常温和37℃保存40 d后检测结果稳定。说明基于Tris辅助法制备胶体金的猪轮状病毒免疫层析试纸条,各方面性能均达到临床快速检测的要求,可用于临床检测。
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单位广西大学; 广西农垦永新畜牧集团金光有限公司; 广西农业职业技术学院; 动物科技学院