组蛋白H3Thr3磷酸化在Sf9细胞有丝分裂中的动态定位

作者：张冰; 徐茜; 唐存多; 王姣玲; 吴盼盼; 朱露露; 阚云超^*

来源：昆虫学报, 2018, 61(11): 1247-1252.

DOI：10.16380/j.kcxb.2018.11.001

• Sf9细胞
• 组蛋白H3
• 磷酸化
• 有丝分裂
• 免疫荧光
• 胞质分裂

【目的】研究组蛋白H3Thr3磷酸化这一表观标记在Sf9细胞有丝分裂中的功能。【方法】通过固相法合成一段包含组蛋白H3第1-9位氨基酸的肽段[ARTKQTARKC],将第3位苏氨酸进行磷酸化修饰(P-Pep 226555)或者不修饰(NP-Pep 080472)后制备抗体,Western blot检测抗体的特异性。培养Sf9细胞,通过爬片制备细胞处于有丝分裂不同时期的玻片,以免疫荧光标记检测磷酸化H3Thr3(H3Thr3ph)抗体在Sf9细胞有丝分裂不同时期的定位特点。【结果】在Sf9细胞中,组蛋白H3Thr3的磷酸化发生在前期细胞染色体的特定位置;随着细胞周期的进行,磷酸化信号逐渐增强,中期达到最高水平,有丝分裂后期在形成子细胞的赤道板处均匀分布,末期仅在赤道板特定位置残留微弱的磷酸化信号。【结论】H3Thr3的磷酸化与Sf9细胞胞质有丝分裂相关。

• 单位
  南阳师范学院