摘要
目的 研究化瘀解毒方含药血清(HJRMS)对人肺癌A549细胞凋亡的影响,探明HJRMS诱导促进人肺癌A549细胞凋亡的作用及机制。方法 运用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测HJRMS对人肺癌A549细胞活力的影响,确定HJRMS作用于人肺癌A549细胞的半数抑制浓度(IC50)。利用流式细胞技术检测不同浓度HJRMS对人肺癌A549细胞凋亡的影响。利用Western印迹检测HJRMS对人肺癌A549凋亡相关蛋白表达情况的影响。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)用来检测HJRMS对人肺癌A549细胞凋亡相关蛋白信使RNA(mRNA)表达水平的影响。结果 MTT结果显示,随着HJRMS浓度的不断增加,人肺癌A549细胞的增殖受到明显抑制,细胞活力下降明显(P<0.05),呈明显的浓度依赖性。流式细胞技术结果显示,HJRMS可以显著促进肺癌细胞的凋亡,随着HJRMS浓度的增加,细胞的凋亡逐渐显著增多(P<0.05)。Western印迹结果显示,HJRMS可以明显提高B细胞淋巴瘤(Bcl)-2细胞凋亡抵抗(Bad)蛋白和Caspase-3等促凋亡蛋白的表达(P<0.05),同时显著抑制肺癌细胞凋亡相关蛋白Bcl-2的表达(P<0.05)。qRT-PCR结果表明,HJRMS可以有效抑制肺癌细胞中Bcl-2 mRNA的表达丰度(P<0.05),同时显著促进Bad mRNA的表达水平(P<0.05)。结论 HJRMS可以明显抑制人肺癌A549细胞的增殖活力,促进人肺癌A549细胞的凋亡,其作用很可能是通过提高Bad mRNA表达丰度,抑制Bcl-2蛋白的表达来实现的。
-
单位河南中医药大学; 河南省中医药研究院