H9和H10亚型禽流感病毒三重RT-PCR检测方法的建立

作者：李丹; 谢芝勋^*; 李孟; 罗思思; 谢丽基; 张民秀; 黄娇玲; 范晴; 王盛; 谢志勤; 邓显文; 曾婷婷; 张艳芳

来源：江西农业学报, 2020, 32(04): 113-117.

DOI：10.19386/j.cnki.jxnyxb.2020.04.20

• 禽流感病毒
• H9亚型
• H10亚型
• M基因
• 三重RT-PCR
• 检测

根据GenBank中H9和H10亚型禽流感病毒(AIV)的HA基因及所有亚型AIV M基因的保守序列,分别设计3对特异性引物,并优化退火温度和引物浓度及其配比等条件,建立了可同时鉴别检测H9和H10亚型AIV的三重RT-PCR检测方法。特异性实验结果表明,该方法可以特异性地扩增出H9、H10亚型AIV及M基因对应大小的目的条带,而对其余亚型AIV仅M基因出现特异性条带,其它禽病病原体均未扩增出任何特异性条带。敏感性实验结果表明,该方法对H9、H10亚型HA基因及M基因质粒的扩增下限均为5×104拷贝/μL。此外,该方法对临床样品的检测结果与病毒分离及测序结果完全一致。

• 单位
  广西壮族自治区兽医研究所