摘要
目的比较研究氯甲基苯甲酰氨(CM-Dil)和5-乙炔基-2'-脱氧尿嘧啶核苷(EdU)对大鼠脂肪干细胞(ADSCs)的体外标记示踪效果,为ADSCs移植治疗勃起功能障碍体内研究寻找最佳的干细胞示踪剂。方法分离和培养SD大鼠ADSCs,分别采用10μmol/L CM-Dil荧光活性染料和50μmol/L EdU标记第4代ADSCs,并通过流式细胞术和荧光显微镜检测标记后第7、14、21、28天细胞阳性率。结果 CM-Dil和EdU两者对ADSCs生物学特性均无明显影响。CM-Dil标记ADSCs阳性率达(99.6±0.2)%,第21天后荧光开始衰减,第35天细胞阳性率仍达(64.2±3.3)%;EdU标记ADSCs阳性率为(87.1±1.8)%,7 d后细胞阳性率逐渐降低,第14天后急剧降低,第28天细胞阳性率为(14.4±2.7)%。结论 CM-Dil和EdU两者均适用于ADSCs标记示踪,CM-Dil标记具有操作简单、标记阳性率高、荧光持久等优点,适用于长期标记示踪,EdU仅适用于短期标记示踪。
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