大剂量辐射诱导IEC-6细胞差异表达基因消减cDNA文库的构建

作者：王锋超; 高京生; 粟永萍; 徐辉; 王军平; 艾国平; 苑晓燕; 楼淑芬; 刘晓宏; 章波; 黄跃生; 蒋建新

来源：第三军医大学学报, 2004, (01): 10-14.

DOI：10.16016/j.1000-5404.2004.01.005

• IEC-6
• 大剂量辐射
• 抑制性消减杂交
• 基因文库 IEC 6
• high dose radiation
• suppression subtractive hybridization
• library

目的　克隆和鉴定大剂量辐射前后大鼠空肠上皮细胞IEC 6差异表达基因 ,为探索肠上皮细胞辐射损伤修复的分子机制提供线索。方法　IEC 6细胞经 3 5Gyγ射线照射后由抑制性消减杂交 (SSH)方法和T/A克隆技术进行差异表达基因消减cDNA文库的构建 ,用反向Northern杂交法对库中的EST序列进行筛选 ,挑取阳性克隆测序 ,和GenBank比对后挑选有限克隆进行正向Northern杂交进行验证。结果　扩增消减杂交cDNA文库得到约 2 0 0 0个克隆 ,随机选取 96个白色克隆进行PCR扩增 ,用反向Northern杂交法对库中的EST片段进行筛选得到 15个阳性克隆 ,代表 12个...

• 单位
  创伤、烧伤与复合伤研究国家重点实验室; 第三军医大学