TRPC家族在TGF-β1诱导足细胞钙离子内流中的表达及作用

作者：黄海庭; 林栩^*; 郭鹏威; 庞君; 马静; 何林檩; 郑心彤

来源：生理学报, 2022, 74(06): 1005-1013.

DOI：10.13294/j.aps.2022.0071

• 转化生长因子-β1
• 足细胞
• 瞬时受体电位阳离子通道蛋白
• 钙离子

瞬时受体电位阳离子通道蛋白(transient receptor potential cation channel, TRPC)是哺乳动物重要的阳离子通道蛋白，参与细胞多种生理和病理过程。本研究组前期研究发现转化生长因子-β1 (transforming growth factor-β1, TGF-β1)可提高肾小球足细胞TRPC6的表达，为进一步明确TRPC家族其他成员在足细胞损伤中的作用，本研究探讨TGF-β1对足细胞TRPC家族表达的影响以及TRPC家族在TGF-β1诱导足细胞内钙离子浓度变化中的作用。体外培养条件永生化肾小球足细胞株MPC5，通过TGF-β1构建足细胞损伤模型，qRT-PCR和Western blot法检测TGF-β1干预对足细胞TRPC家族mRNA和蛋白表达水平的影响。通过基因干扰siRNA技术和药理学方法分别抑制TRPC家族表达后，荧光探针Fluo-3/AM静态检测足细胞游离钙水平，动态高速钙离子成像系统检测足细胞内钙离子浓度动态变化。结果显示，与正常对照组相比，TGF-β1可使足细胞TRPC1/3/6蛋白表达增多，对TRPC4蛋白表达无影响，对TRPC5/7蛋白表达分别只在4 ng/mL和8 ng/mL时有显著影响。TGF-β1可使足细胞TRPC1/3/6 mRNA表达增多，对TRPC4/5/7 mRNA表达无明显影响。TGF-β1干预可显著提高足细胞内钙离子浓度，TRPC1/4/5/7低表达对TGF-β1干预下足细胞内钙离子浓度无明显影响，TRPC3/6低表达可降低TGF-β1干预下足细胞内钙离子浓度。TRPC6低表达组足细胞内钙离子浓度与SKF96365 (TRPC通道广泛抑制剂)组相当，TRPC3低表达组钙离子浓度高于SKF96365组。以上结果提示，TGF-β1可使足细胞TRPC1/3/6表达升高，TGF-β1提高足细胞内钙离子浓度与TRPC3/6有关，TRPC6对足细胞内钙离子浓度的影响程度可能大于TRPC3。

• 单位
  右江民族医学院附属医院