银黑狐MC1R基因核心启动子区的鉴定

作者：刘华云; 张磊; 徐桂利; 张天浩; 谢遇春; 段玲欣; 刘铮铸^*; 巩元芳^*

来源：中国畜牧兽医, 2022, 49(07): 2442-2450.

DOI：10.16431/j.cnki.1671-7236.2022.07.002

• 银黑狐
• MC1R基因
• 启动子
• 核心区

【目的】确定银黑狐黑素皮质激素受体1(melanocortin 1 receptor, MC1R)基因的核心启动子区，为探究该基因的表达调控机制提供理论依据。【方法】以银黑狐基因组DNA为模板，PCR扩增获得MC1R基因5′-UTR区序列，利用3个在线生物学软件综合预测MC1R基因启动子活性区；PCR扩增获得该基因5′-UTR区不同长度的缺失片段，并克隆至pMD19-T载体，将重组质粒转染至黑色素B16细胞中，利用双荧光素酶检测技术对10个缺失片段进行荧光素酶活性检测。【结果】成功获得银黑狐MC1R基因5′-UTR区序列，软件预测显示-596/+73 bp可能为启动子活性区。双荧光素酶活性检测发现，构建的10个缺失片段的荧光素酶表达载体均具有启动子活性，其中pGL3-MC1RP8(-520/+73 bp)有较强的活性，提示其为核心启动子区，与软件预测结果基本一致。【结论】试验确定了银黑狐MC1R基因的核心启动子区为―520/+73 bp,为深入研究该基因的毛色调控机制奠定了理论基础。

• 单位
  动物科技学院; 河北科技师范学院