基于cry1Ac表达调控元件的苏云金芽孢杆菌表达载体构建

作者：郑文; 叶伟星; 彭东海; 孙明

来源：湖北农业科学, 2012, (02): 400-405.

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2012.02.036

• 苏云金芽孢杆菌
• 表达载体
• cry基因
• BtI-BtII启动子 Bacillus thuringiensis
• expression vector
• cry gene
• BtI-BtII promoter

通过克隆cry1Ac基因BtI-BtII启动子、SD序列以及终止子,并引入pET28a的His标签和多克隆位点,在穿梭载体pHT304的基础上构建了一个苏云金芽孢杆菌表达载体pBMB1A。将cry1Ac以及具有非典型BtI-BtII启动子的cry2Ab、cry5Ba、cry6Aa、cry7Ba、cry55Aa 6个基因装载到该表达载体上,转入BMB171构建了重组菌株,通过复红简单染色后的显微镜镜检结果表明,重组菌株BMB1A-1Ac、BMB1A-5Ba、BMB1A-7Ba和BMB1A-55Aa均能形成正常晶体,SDS-PAGE结果也证实这4个重组菌株的重组质粒均能表达出目的蛋白。同时,选取重...

• 单位
  生命科学技术学院; 农业微生物学国家重点实验室; 华中农业大学